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北京博镁基业科学仪器技术公司

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德国Qiagen(凯杰)试剂盒食品基因组DNA提取试剂盒

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  • 详细介绍

从富集微生物的培养基、食物原材料或成品中提取高品质DNA

 改良了CTAB方法,可更快的处理样本

 从食物成品中高效的纯化DNA片段

 快速、高效的裂解革兰氏阴性和阳性细菌

 处理复杂食物样本时不会残留PCR抑制剂

mericon Sample Preparation Kits适用于从多种初始材料中提纯高品质核酸,如经富集的培养基(mericon DNA BacteriaBacteria Plus Kits)及多种食物原材料与成品(DNeasy mericon Food Kit)等。这些复杂食物样本的纯化产物中所含PCR抑制剂的水平达到最低。纯化获得的DNA适用于各种下游应用,如应用mericon PCR Assays Kits进行real-time PCR成分鉴定、病原体检测;或GMO DNA定量检测。

特点

参数

应用

PCR, real-time, genotyping

洗脱体积

100 μl (mericon DNA Bacteria and DNA Bacteria Plus Kit), 150 μl (DNeasy mericon Food Kit)

规格

spin columns (DNeasy mericon food Kit), microcentrifuge tube (DNA Bacteria Kit), icrocentrifuge tube with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit)

主要样本类型

fod, e.g. chocolate, ketchup, cereals (DNeasy mericon Food Kit), bacterial culture from food (DNA Bacteria Kit and DNA Bacteria Plus Kt)

处理

manual

纯化总RNAmiRNApoly A+ mRNADNA或蛋白

DNA

样本量

1 ml culture (DNA Bacteria and Bacteria Plus Kit), 2 g (DNeasy mericon Food Kit)

技术

silica technology (DNeasy mericon food Kit), boiling lysis (DNA Bacteria Kit), disruption with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit)

每次运行或制备时间

20 minutes - 1 hour (DNeasy mericon Food Kit)

产量

depends on DNA contents of the sample


性能

DNeasy mericon Food Kit

生产过程中,食物容易受到热、高压和pH值变化的影响,这些会导致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的优化试剂专为回收短的DNA片段(100 bp)而设计,确保高度片段化的DNA可被有效分离,并在PCR反应中进行扩增。凭借这些优势,DNeasy mericon Food Kit是第一个可广泛应用于从强抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中纯化核酸的试剂盒,结果可靠,而且可得到最佳纯化效果(参见High yields of DNA with minimal inhibitor carryover)。

mericon DNA BacteriaDNA Bacteria Plus Kits

热裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit,机械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,两种试剂盒从革兰氏阴性细菌中提取DNA的效率相同。但是,如果从革兰氏阳性细菌中提取DNA,机械裂解更加有效(参见Efficient bacterial DNA extraction)。

原理

DNeasy mericon Food Kit

该试剂盒采用改良的CTAB纯化细胞内核酸。CTAB是非离子去污剂,广泛用于从多种类型的组织样本中高效提纯细胞内核酸。与盐浓度相关,CTAB可能与细胞内核酸结合(低盐浓度);也可与细胞内的抑制剂结合,如多糖、蛋白质和植物代谢产物(高盐浓度,如在Food Lysis Buffer中)。

这种提纯方法的步骤少于传统CTAB 操作方法,应用DNeasy mericon Food Kit可在2.5个小时内可处理多达30个样本(参见Efficient and rapid DNA extraction)。

经优化的方案,采用CTAB和蛋白酶K初步消化紧密组织,然后同时沉淀蛋白质和其他细胞内和来自于食品本身的抑制剂。

离心后抑制剂沉淀下来,而提纯的DNA保留在溶液中。然后进行氯仿抽提,所有剩余的、未沉淀CTAB结合蛋白、CTAB结合杂质或 CTAB 结合多糖都将与其他脂溶性抑制剂一起被抽提入氯仿层。水层中含有DNA和极少的抑制剂,将进一步处理。在水相中加入结合缓冲液(调节结合条件),将其上样到QIAquick Spin Column。纯化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。

mericon DNA Bacteria Kitmericon DNA Bacteria Plus Kit

到目前为止,检测食品病原体的主要方法是通过培养基和/ELISA分析法。分子检测方法,尤其是real-time PCR,经常作为这些常用方法的补充。

热裂解使用mericon DNA Bacteria Kit,适用于多数易于裂解的革兰氏阴性细菌(如沙门氏菌Salmonella spp.、弯曲杆菌Campylobacter spp. 和阪崎氏肠杆菌Cronobacter spp.)。机械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,适用于革兰氏阳性细菌,如单增李斯特菌Listeria spp.

mericon DNA Bacteria Kitmericon DNA Bacteria Plus Kit中的专用化学试剂可最大程度上提高裂解效率,稳定提纯的DNA,并去除可能干扰下游应用的抑制剂。

操作流程

DNeasy mericon Food Kit

使用简单的操作方法,从匀质的食物样本中提纯DNA,获得的纯DNA适用于各种下游应用,如real-time PCR成份分析或GMO检测。

mericon DNA Bacteria Kitmericon DNA Bacteria Plus Kit

使用机械裂解(钢珠)和热裂解(煮)的操作方法,从病原体富集的培养基中提纯细菌DNA。两种操作方法都需转移细菌 DNA悬浮液,以适用于real-time PCR病原体检测。

应用

应用DNeasy mericon Food Kit从食物原材料或成品中纯化的DNA适用于各种下游应用,如成份鉴定。

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