货号：74004 痕量样品总RNA提取试剂盒 (50)
英文名称：RNeasy Micro Kit (50)
中文名称：痕量样品总RNA提取试剂盒 (50)
品 牌：Qiagen
货 号：74004
从细胞或组织样本中纯化至多45 μg的总RNA
数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
即用型RNA在各种下游应用中表现良好
微量起始样本， RNA产量稳定
无需酚/氯仿抽提
无需CsCl梯度离心，无需LiCl或乙醇沉淀
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RNeasy Micro Kit专用于从微量细胞和组织样本中纯化至多45 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本，使用TissueRuptor或TissueLyser体系高效破碎样本。可在QIAcube全自动核酸分析仪上应用RNeasy Micro Kit实现RNA纯化全自动化。处理更大的样本，可使用RNeasy Mini Kit（离心柱结合能力为100 μg RNA）、RNeasy Midi Kit（离心柱结合能力为1 mg RNA）或RNeasy Maxi Kit（离心柱结合能力为6 mg）。
特点
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参数
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应用
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PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
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洗脱体积
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10–14 μl
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规格
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Spin column
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主要样本类型
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Tissue, cells
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处理
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Manual
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纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
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RNA
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样本量
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<5 mg
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技术
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Silica technology
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每次运行或制备时间
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30–40 minutes
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产量
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Varies
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性能
RNeasy Micro Kit可从微量样本中得到高产量总RNA，且重复性好。从少量细胞，包括单细胞以及微量标准组织样本中都能纯化得到总RNA（参见Reliable RNA isolation from a single cell、Highly reproducible yields for sensitive applications和High-quality total RNA from fine needle aspirates）。RNeasy Micro Kit通过高效的柱上基因组DNA消化可使珍贵的样本在定量基因表达分析中得到最大的敏感度，如real-time RT-PCR（参见Efficient on-column removal of genomic DNA）。
原理
RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA，如显微切割组织、细针穿刺样本、微量纤维组织包括心脏和肌肉组织、微量细胞、甚至是单细胞（如FACS筛选细胞）。处理显微切割FFPE组织，我们推荐使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA的纯化技术。RNeasy MinElute离心柱独特的设计可确保最小的洗脱体积，小至10 μl，实现RNA的高度浓缩。小洗脱体积意味着下游的反应可控制在小体积范围内，提高反应效率。高纯度确保全部样本可用于反转录等下游应用，无酶抑制。
操作流程
RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA。先对样本（<5 mg组织或<5 x 105个细胞）进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy MinElute离心柱，RNA（至多45 μg）结合到硅胶膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase，确保简单、高效的柱上基因组DNA消化，适用于敏感的应用。DNase和其他污染物被高效洗去后，10–14 μl水洗脱得到高浓度的纯化RNA。
应用
RNeasy Micro Kit纯化得到小洗脱体积（10 μl）RNA，重复性好，适用于敏感的定量基因表达分析，包括以单细胞为起始样本的real-time RT-PCR。