货号：70022 mRNA纯化试剂盒 (12)
英文名称：Oligotex mRNA Mini Kit (12)
中文名称：mRNA纯化试剂盒 (12)
品 牌：Qiagen
货 号：70022
从总RNA中纯化mRNA以及回收体外转录产物
只需30分钟即可获得高产量纯MRNA
无需使用Oligo-DT纤维素或乙醇沉淀
灵活性强，适合不同起始量的RNA样品
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Oligotex mRNA Kits可从总RNA中纯化mRNA，回收poly A+体外转录子。每个Oligotex Kit包括用于结合poly A+ mRNA的Oligotex树脂和用于洗涤、洗脱结合的mRNA的离心柱。Oligotex Direct mRNA Kits可从细胞和组织中纯化mRNA。
特点
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参数
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应用
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PCR, real-time PCR, microarray, transfection..
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洗脱体积
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20–100 μl
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规格
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Spin column
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主要样本类型
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Total RNA
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处理
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Manual (centrifugation)
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纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
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Poly A+ mRNA
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样本量
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<250 μg
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稳定
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Yes
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技术
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Polystyrene-latex particles
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每次运行或制备时间
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33–50 minutes
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产量
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>90% recovery
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性能
Oligotex mRNA kits适用于从少于0.25 mg到1 mg总RNA起始材料中分离mRNA（见表）。
使用Oligotex树脂纯化的Poly A+ mRNA适用于RT-PCR（参见RT-PCR of beta-actin mRNA），使用Oligotex树脂从总RNA中纯化的poly A+ mRNA已被用于Northern 印记、点印记或狭缝印记（参见Isolation of mRNA from total RNA）。
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表. Oligotex mRNA kits的规格每次实验起始材料量（总RNA）
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每个Oligotex mRNA Mini Kit*最多制备次数
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每个Oligotex mRNA Midi Kit*最多制备次数
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≤0.25 mg
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12 (13)?
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12 (28)?
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0.25—0.5 mg
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6
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12 (14)?
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0.5—0.75 mg
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4
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12 (14)?
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0.75—1 mg
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3
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12
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* 使用离心管操作流程。批量实验流程可选。
? 购买额外的离心柱后，每个试剂盒的最多制备次数。可能需要额外的1.5 ml微离心管。
原理
Oligotex mRNA Kits含有离心柱和各种必需的试剂，用于从总RNA样品中纯化poly A+ mRNA或回收体外转录产物。Oligotex树脂由大小均一（直径1.1 μm ）的聚苯乙烯-橡胶颗粒组成，为完美的球状（参见Oligotex particles and oligo-dT cellulose），含有与表面共价结合的dC10T30寡核苷酸。Oligotex颗粒的大小、成分和表面结构经优化，均匀分散并需要最少的离心时间。颗粒形成稳定的悬浮液，为快速和高效结合多聚腺苷酸提供较大的表面积。
高效率、高精确度的杂交确保通过快速、高效的杂交获得高纯度的poly A+ mRNA。mRNA回收率通常都高于90%。Oligotex纯化过程将poly A+ RNA流失降至最低，避免RNase降解风险，手动操作时间最少化。这些都使得该产品是同步处理多个样品的理想选择。Poly A+ mRNA适用于各种标准应用，也适用于敏感应用，如表达分析、差异显示、cDNA文库构建、显微注射和SAGE技术。Oligotex Suspension也可单独购买。
操作流程
经优化的Oligotex纯化流程方便简单（参见Oligotex mRNA procedure），将总RNA与Oligotex树脂共同孵育，简单离心收集Oligotex:mRNA复合物。试剂盒中提供的离心柱提供最方便的操作，同时为某些应用提供可选的批量操作流程。洗涤之后，用小体积量的Tris缓冲夜或水洗脱mRNA。无需乙醇沉淀。
应用
使用Oligotex树脂纯化的Poly A+ mRNA适用于多种下游应用，包括：
RT-PCR
CDNA合成
CDNA库的构建
消减杂交
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